本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预包被抗牛乙酰辅酶 A 羧化酶(ACC)抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,加入牛乙酰辅酶 A 羧化酶(ACC)校准品和待测样本,再加入另一株 HRP 标记的抗牛乙酰辅酶 A 羧化酶(ACC)抗体(酶标抗体),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物 A 和 B,底物在 HRP 催化下,产生蓝色产物,在终止液(2 M硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪 450 nm波长上测定吸光度(OD 值),吸光度(OD 值)与待测样品中牛乙酰辅酶 A 羧化酶(ACC)的浓度正相关。拟合校准品曲线,可以计算出样本中牛乙酰辅酶 A 羧化酶(ACC)的浓度。

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